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“人工授精”知多少
精液优化处理
医生,刚刚我把取好的精液送到“小黑屋”里,给里面的工作人员了,接下来要做什么呢?
接下来就等实验室做精液优化处理。
优化处理就是之前跟我讲的“洗精子”、“提炼精子”?
是的。
那么,当患者完成取精,按响门铃,将精液通过传递窗交给实验室核对接收后,窗口后面又发生了什么呢?
PART 01精液优化处理
精液样本的优化处理主要通过精子洗涤完成,俗称“洗精子”、“精子提炼”。其目的是将精子和其他物质分离开来,如白细胞,病毒,细菌等,尽可能回收活力充沛的精子,从而提升精液质量,提高成功率。目前主要的人工授精精液优化处理方法有:密度梯度离心法、上游法及梯度离心联合上游法,本中心主要采用密度梯度离心法。
PART 02密度梯度离心法
密度梯度离心法是一种分离不同沉降系数颗粒的方法。它利用不与所分离颗粒起作用的介质配制成连续的或不连续的密度梯度,在离心管中自下而上由浓到稀地依次叠加,需分离的颗粒经离心后,不同密度的颗粒各自停留在相应的密度层中,从而达到分离的目的。由于成熟且形态正常的精子、未成熟或畸形的精子、死精子、白细胞及细菌等物质的沉降系数不同,在一定的离心力的作用下,每种细胞在离心后就会停留在不同的梯度层中,成熟且形态正常的精子在试管底部沉淀,从而达到“提炼”的目的。
PART 03主要实验操作步骤
1.精液收集
禁欲3-7天,为防止样本受污染,由护士告知病人先排尿并洗净双手,在相对无菌条件下,采用无菌洁净的专用取精杯,手淫法取精,取出后经传递窗立即送入精液处理室。核对夫妻双方身份证、结婚证及专用取精杯上的姓名,吸取少量精液滴在精液标本卡上,并及时装入精液标本卡专用袋。
2、室温孵育半小时,充分液化。
3、取14ml圆底试管,写上患者夫妇姓名、日期和病历号,将患者标本装入管内,显微镜初步镜检(精液浓度、活率、前向运动率等)。
4、密度梯度离心法:按1:1的比例向离心管加入LOWER LAYER (ISOLATE), UPPER LAYER (ISOLATE),从下到上缓慢加入,注意各层液面必须保持清晰的界面。
5、将混匀好的精液缓缓加入离心管梯度液面上层,300g离心20min。
6、离心好后,取出,弃上清,吸取沉淀,加入到1ml培养液(MHM)中混匀,300g离心5min。
7、离心好后,弃上清,用1ml移液管将沉淀调整为0.3ml。吸取处理好的精液,记录精子浓度,活力等。
8、将处理好的精液交接给护士,随后进入人工授精手术环节。
人工授精是精液经体外优化处理后,形成浓度高且活动力好的精子悬液,再注入女方宫腔内以获得妊娠的助孕方法。精液优化处理方法可应用于少、弱、畸精子症,精液不液化或过度黏稠,白细胞过多以及不明原因等引起的男性不育症,有着创伤小、操作简单、花费较少等优势。但精液优化处理结果主要取决于男性本身的精液质量,实验室操作人员无法改变精子的本身,原则上人工授精精液的前向运动精子总数不得少于20×106/次射精。
文字 | 陈梦茜
编辑 | 鲁玉霞
沈凤颖
审核 | 赵 静
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创建于: 2024-06-27 18:07:24
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